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单品上新-蛋白/抗体荧光标记试剂盒

2024-10-21 分享

单品上新-蛋白/抗体荧光标记试剂盒

产品概述

Cy5/Cy5.5/Cy7偶联试剂盒可以通过抗体/蛋白上的伯胺基团(如赖氨酸),简单、快速地实现抗体/蛋白与 Cy5/Cy5.5/Cy7的共价偶联。

此为通用型试剂盒,适合各种分子量不一致的抗体/蛋白偶联Cy5/Cy5.5/Cy7。偶联在30 分钟内即可完成,偶联效率可达70%左右。使用超滤管纯化,可快速去除多余Cy5/Cy5.5/Cy7,且不会损失抗体/蛋白。 

优点

1、操作便捷,反应快速。

2、偶联效率高,且延长反应时间不影响偶联效率。

3、此为通用型试剂盒,适合各种分子量不一致的抗体/蛋白偶联Cy5/Cy5.5/Cy7。

4、实验结果重现性好。     


偶联反应示意图

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Cy5/Cy5.5/Cy7偶联试剂盒使用说明

Cy5/Cy5.5/Cy7偶联试剂盒可以通过抗体/蛋白上的伯胺基团(如赖氨酸),简单、快速地实现抗体/蛋白与Cy5/Cy5.5/Cy7的共价偶联。此为通用型试剂盒,适合各种分子量不一致的抗体/蛋白偶联Cy5/Cy5.5/Cy7。

偶联在30分钟内即可完成,偶联效率可达70%左右。使用超滤管纯化,可快速去除多余Cy5/Cy5.5/Cy7,且不会损失抗体/蛋白。    

试剂盒组成

数量

保存温度

Cy5/Cy5.5/Cy7mix(含10 % Cy5/Cy5.5/Cy7)

10mg

-20 ℃

Coupling Reagent

2 mL

4 ℃

Cy5/Cy5.5/Cy7 mix溶解液

2 mL

4 ℃

超滤管(3.5kD)

2支

室温

 实验步骤

  1. 取1~10 mg抗体/蛋白溶解于1 mL纯水中,加入100 μL Coupling Reagent,混合均匀。

(以下步骤按标记1 mg抗体/蛋白为例)。

  2. 根据Cy5/Cy5.5/Cy7标记需求量,称取0.1 ~1 mg Cy5/Cy5.5/Cy7mix固体加至第1步溶液,充分混合溶解。

  注:(a) 若Cy5/Cy5.5/Cy7mix用量超出1 mg,可能导致荧光标记过量,引起荧光部分淬灭;

(b) 若低于1 mg的Cy5/Cy5.5/Cy7mix难以称取,可先取1 mg Cy5/Cy5.5/Cy7mix固体溶解于100 μL Cy5/Cy5.5/Cy7 mix溶解液,再按需取Cy5/Cy5.5/Cy7mix溶液加至第1步溶液。由于Cy5/Cy5.5/Cy7mix溶解后易分解,溶液须尽快使用且不可保存。

3. 室温避光反应30 min,延长反应时间不影响偶联效率。

4. 将反应液转移至超滤管,10000rpm超滤5 min,即可除去未反应的Cy5/Cy5.5/Cy7和无机盐成分,为提高纯度,可加入纯水重悬抗体/蛋白,重复超滤1~2次。

5. 使用纯水或PBS将超滤管截留下的抗体/蛋白重悬,即得到Cy5/Cy5.5/Cy7标记的抗体/蛋白溶液。

注意事项

1. 偶联前抗体/蛋白中可能含有成分,建议低于以下比例:

组分

建议比例

甘油

< 50%

叠氮化钠

< 0.1%

含氨基的缓冲液(如Tris)

0

pH

7.0-8.5

伯胺(如氨基酸、乙醇胺等)

0

硫醇(如巯基乙醇、 DTT等)

0

2. 偶联后的抗体/蛋白应避光保存。通常在4 ℃下可保存6~12个月。如需保存更长时间,可加入冷冻保护剂如50%甘油,在-20℃保存。