基于荧光罗丹明的化学生物传感器用于监测细胞NADPH动力学
2024-10-24
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导语
给大家分享一篇发表在期刊 J. Am. Chem. Soc. 上的综述文献:Fluorogenic Rhodamine-Based Chemigenetic Biosensor for Monitoring Cellular NADPH Dynamics
概要
采用福斯特共振能量转移(FRET)的比率型生物传感器能够实时追踪代谢物动态。本文介绍了一种构建基于FRET的生物传感器的方法,其中表观FRET效率的变化依赖于罗丹明受分析物控制的荧光性,而非通常所用的供体-受体荧光团之间的距离变化。本文研发的荧光型、罗丹明基、化学遗传生物传感器(FOCS)依赖于一种合成的、与蛋白质相连的FRET探针,其中作为FRET受体的罗丹明以依赖于分析物的方式从暗态切换到荧光态。这允许对分析物浓度进行比率型检测。本文采用这种方法构建了一种针对烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)的化学遗传生物传感器。FOCS-NADPH对NADPH具有快速且可逆的响应,具有良好的动态范围、选择性和pH不敏感性。FOCS-NADPH能够在氧化应激或药物暴露期间实时监测活细胞内细胞质NADPH的波动。本文还利用FOCS-NADPH研究了通过葡萄糖代谢的磷酸戊糖途径对NADPH稳态的调控。FOCS-NADPH是研究NADPH代谢的有力工具,并为未来荧光生物传感器的开发提供了蓝图。
参考文献:DOI:10.1021/jacs.3c13137