CY5红色荧光染料修饰乳铁蛋白,cy5-Lactoferrin
CY5红色荧光染料修饰乳铁蛋白,cy5-Lactoferrin
名称:CY5红色荧光染料修饰乳铁蛋白,cy5-Lactoferrin
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
CY5 红色荧光染料修饰乳铁蛋白(cy5 - Lactoferrin)合成方法
材料准备:高纯度乳铁蛋白、CY5 - NHS 酯、0.05 M 的硼酸盐缓冲液(pH 8.5)、透析设备、离心机。
反应过程:将乳铁蛋白溶解在硼酸盐缓冲液中,配制成浓度为 1 - 2 mg/mL 的溶液。将 CY5 - NHS 酯溶解于无水 DMSO,配制成浓度为 10 - 20 mM 的溶液。在搅拌条件下,将 CY5 - NHS 酯的 DMSO 溶液缓慢滴加到乳铁蛋白溶液中,CY5 - NHS 酯与乳铁蛋白中赖氨酸残基的氨基发生反应,二者摩尔比控制在 10 - 20:1。由于蛋白质分子较大,且赖氨酸残基数量较多,适当增加染料比例有利于充分标记。在 4℃下避光反应 12 - 16 小时,低温可减少蛋白质变性风险。
产物精制:反应结束后,将反应液转移至透析袋中,用大量的 0.01 M PBS 缓冲液(pH 7.4)透析 24 - 36 小时,以去除未反应的 CY5 - NHS 酯和 DMSO。透析完成后,将溶液转移至离心管中,以 10000 - 12000 rpm 的转速离心 10 - 15 分钟,去除可能产生的沉淀。取上清液,通过分子筛色谱(如 Superdex 200)进一步纯化,以 PBS 缓冲液为流动相。收集含有 cy5 - Lactoferrin 的洗脱峰,浓缩后得到纯化的标记产物。采用十二烷基硫酸钠 - 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS - PAGE)和荧光光谱分析对产物进行鉴定和定量。
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