生物素连接酶(Biotin-protein ligase, BirA)用于蛋白标记

生物素连接酶(Biotin-protein ligase, BirA)用于蛋白标记

蛋白互作临近标记技术：可通过生物素连接酶(Biotin-protein ligase, BirA)对Avi标签融合蛋白或多肽快捷、高效地进行生物素标记。生物素标记的蛋白可使用基于Streptavidin或Avidin方法进行纯化或检测，例如使用Streptavidin磁珠对生物素标记蛋白进行纯化，或用HRP等标记的Streptavidin对生物素标记蛋白进行检测。

Avi标签是由15个氨基酸(GLNDIFEAQKIEWHE)组成的短肽标签，在ATP和生物素存在的条件下，BirA在Avi标签的赖氨酸残基上连接一个生物素，从而实现目的蛋白的生物素标记。

生物素连接酶BirA特异性的生物素标记Avi标签有多方面的优点：

Avi标签小且对融合蛋白的影响非常小，只针对Avi标签上的Lys残基进行特定位置的生物素标记，生物素标记效率高，可重复性好；

体内或体外均可进行标记，标记后的蛋白与链霉亲和素(Streptavidin)的亲和力高，从而使Avi-tag技术可以应用于目的蛋白的固定吸附、纯化和检测等；

相比于传统生物素化学标记的非特异性位点的标记，BirA催化的反应条件更温和、更简单，对被标记蛋白活力影响小，酶活效率高，标记特异性强。