生物素标记蛋白应用实例
2024-09-14
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生物素是什么？
生物素是由植物或者原核生物生产的一种可溶性小分子物质，可与卵白素或链霉素亲和素 通过非共价结合，结合力Kd值高达10^-15mol/l。生物素与亲和素的结合能力是抗原抗体结合的100万倍。
生物素由咪唑酮环和噻吩环组成，与亲和素结合的主要是咪唑酮环，而噻吩环侧链末端的羧基则结合抗体和其他大分子物质。
生物素-亲和素系统的应用
1、组织化学
2、免疫荧光、免疫放射技术、胶体金技术
3、分子生物学、基因表达调控
生物素标记蛋白应用实例（Cases）
抗体亲和力成熟-ELISA
Immobilized Human SIRP-α Fc Chimera, Human (Cat. No. UA010005) at 1 μg/mL (100μL/well) can bind Biotinylated Human CD47 Fc Chimera (Cat. No. UA010007) with EC50 of 0.067 μg/ml.
案例：SIRP固定，将生物素化CD47梯度稀释检测两者的结合能力。
案例：在一篇研究人GM-CSF抗体体外亲和力成熟的文献中，作者采用受体抑制ELISA的方法验证GM-CSF与四种抗体和GM-CSFR-alpha链互斥。结果表明抗体与GM-CSF的结合阻止了其余GM-CSFR的结合，亲本MOR03929表现出较低的受体抑制性(IC50-50pM)。